電泳介質(zhì)的pH值 溶液的pH值決定帶電物質(zhì)的解離程度,也決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少.對(duì)蛋白質(zhì),氨基酸等類似兩性電解質(zhì),pH值離等電點(diǎn)越遠(yuǎn),粒子所帶電荷越多,泳動(dòng)速度越快,反之越慢。因此,當(dāng)分離某一種混合物時(shí),應(yīng)選擇一種能擴(kuò)大各種蛋白質(zhì)所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質(zhì)的有效分離.為了保證電泳過程中溶液的pH值恒定,必須采用緩沖溶液。
等電聚焦電泳 是將兩性電解質(zhì)加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當(dāng)其處在低于其本身等電點(diǎn)的環(huán)境中則帶正電荷,向負(fù)極移動(dòng);若其處在高于其本身等電點(diǎn)的環(huán)境中,則帶負(fù)電向正極移動(dòng)。當(dāng)泳動(dòng)到其自身特有的等電點(diǎn)時(shí),其凈電荷為零,泳動(dòng)速度下降到零,具有不同等電點(diǎn)的物質(zhì)后聚焦在各自等電點(diǎn)位置,形成一個(gè)個(gè)清晰的區(qū)帶,分辨率。
在確定的條件下,帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度作用下,單位時(shí)間內(nèi)移動(dòng)的距離(即遷移率)為常數(shù),是該帶電粒子的物化特征性常數(shù)。不同帶電粒子因所帶電荷不同,或雖所帶電荷相同但荷質(zhì)比不同,在同一電場(chǎng)中電泳,經(jīng)一定時(shí)間后,由于移動(dòng)距離不同而相互分離。分開的距離與外加電場(chǎng)的電壓與電泳時(shí)間成正比。
電泳涂裝前表面處理的目的主要是:清除涂膜與涂件表面的障礙,排除影響二者結(jié)合的因素如油污,銹漬,氧化皮及其它雜質(zhì),為電泳涂裝提供如下良好條件: 導(dǎo)電良好,平整度高的表面。 有一個(gè)均勻,細(xì)致,膜厚1~3μm,導(dǎo)電仍良好的保護(hù)膜(磷化膜)該膜不僅可以防止預(yù)涂件在電沉積前不返銹,而且可以提高涂膜的附著力及其質(zhì)量。 預(yù)涂件表面潔凈度,。不污染電泳槽液。 涂件表面仍濕潤(rùn),以利于電沉積。